Olá! Tudo bem?
Para iniciar nossa série de perguntas, vou responder:
- Como fazer um gel de agarose?
O gel de agarose é utilizado na técnica chamada eletroforese, sendo a matriz na qual se separa as macromoléculas de DNA.
Saiba mais sobre eletroforese em https://biomolspace.wixsite.com/tatianebuzanello/post/t%C3%A9cnicas-de-biologia-molecular-eletroforese
PREPARAÇÃO DO GEL DE AGAROSE
Atenção! A concentração do gel deve ser apropriada ao tamanho de macromolécula que está presente na amostra.
Equipamentos necessários:
Balança analítica
Micro-ondas
Cuba horizontal para eletroforese
Preparo do gel:
Os tampões mais usados neste tipo de eletroforese são o tris/acetato (TAE) e o
tris/borato (TBE), porém o TBE não é recomendado para purificação de ácidos nucleicos.
Para gel 1% dissolver 1g de agarose em 100 mL de solução TBE 1X ou TAE 1X.
Aquecer em micro-ondas, evitando que a solução transborde durante o aquecimento. Demora em torno de 30 segundos para a completa dissolução.
Adicionar corante de visualização ao gel (por exemplo, brometo de etídio).
Adicionar o conteúdo no suporte e o pente de plástico para formação dos poços. Esperar polimerizar. A polimerização demora cerca de 10 minutos.
Colocar o gel de agarose (já polimerizado) na cuba.
Imergir completamente com o tampão utilizado anteriormente na produção do gel (TBE 1X ou TAE 1X). Aplicar as amostras a serem analisadas.
Realizar a corrida e analisar o resultado.
É um procedimento simples, informações adicionais podem ser pesquisadas na bibliografia descrita logo abaixo.
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Referências Bibliográficas:
Disponível em
<https://kasvi.com.br/como-preparado-gel-de-agarose-eletroforese/> Acesso 06/02/2021.
Disponível em
<a href="https://www.freepik.es/fotos/tecnologia">Foto de Tecnología creado por wirestock - www.freepik.es</a> Acesso 06/02/2021.
Disponível em
<https://www.fcav.unesp.br/Home/departamentos/biologia/VITORFERNANDESO.DEMIRANDA/protocolo-012--electroforese-em-gel-de-agarose.pdf>
Disponível em
<https://www.univates.br/editora-univates/media/publicacoes/74/pdf_74.pdf>
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